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應(yīng)該怎樣做ELISA試劑盒所需求樣本
更新時間:2019-07-26   點擊次數(shù):1700次

為幫忙我們了解ELISA試劑盒所需求樣本處理及要求,ELISA試劑盒樣本前處理是酶聯(lián)免疫試驗中要害的一步,稍有不小心將導(dǎo)致試驗滿盤皆輸,怎么安全,方便的處理樣本。
我司何做出了以下的分析:

1. 安排標(biāo)本:切開標(biāo)本后,稱取重量。參與一定量的PBS,PH7.4。用液氮敏捷冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后依然堅持2-8℃的溫度。參與一定量的PBS(PH7.4),用手藝或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。細(xì)心收集上清。分裝后一份待檢測,其他冷凍備用。

2. 血清:室溫血液天然凝聚10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。細(xì)心收集上清,保存過程中如出現(xiàn)堆積,應(yīng)再次離心。操作過程中防止任何細(xì)胞影響。運用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。

3. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右  (2000-3000轉(zhuǎn)/分)去除顆粒。細(xì)心收集上清,保存過程中如有堆積構(gòu)成,應(yīng)該再次離心。

4. 標(biāo)本收集后盡早進(jìn)行提取:提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行試驗。若不能立刻進(jìn)行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)防止重復(fù)凍融.

5. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。細(xì)心收集上清,保存過程中如有堆積構(gòu)成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。

6. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。細(xì)心收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度到達(dá)100萬/ml左右。經(jīng)過重復(fù)凍融,以使細(xì)胞損壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。細(xì)心收集上清   。保存過程中如有堆積構(gòu)成,應(yīng)再次離心。

7. 不能檢測含NaN3的樣品:因NaN3克制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

ELISA技術(shù)的操作要害 
杰出的儀器和正確的操作是保證ELISA檢測作用牢靠的必要條件。ELISA的操作因固相載體的構(gòu)成不同而有所差異,國內(nèi)醫(yī)學(xué)查驗一般均用板式點.本文將敘說板式留意要害,要具體的運用說明,嚴(yán)峻遵循規(guī)矩操作,必能得出的作用. 

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